ALFA ACTININA PDF

DISCUSIÓN CONCLUSIONS RESULTADOS Asociación entre el gen alfa- actinina 3 (ACTN3) y el rendimiento en maratón. MÉTODO. alfa actinina pdf to excel. Quote. Postby Just» Tue Aug 28, am. Looking for alfa actinina pdf to excel. Will be grateful for any help! Top. Le catenine sono proteine di cellule animali, coinvolte nei processi di adesione cellulare mediate dalla caderina. Delle quattro catenine note, alfa, beta, gamma e delta, alfa e beta sono stati come le caderine che sono associate con alfa- catenina, che interagisce con la vinculina, alfa-actinina e infine con actina.

Author: Nelabar Voodoogrel
Country: Burundi
Language: English (Spanish)
Genre: Politics
Published (Last): 13 August 2013
Pages: 223
PDF File Size: 10.21 Mb
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ISBN: 768-8-71127-558-2
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An unexpected error occurred. Cardiomiociti isolati possono essere utilizzate immediatamente per cellulari studi elettrofisiologici, biochimici o di immunofluorescenza IF saggi. Click here for the english version. For other languages click here. Tuttavia, precisa la fisiopatologia molecolare che porta a queste malattie resta sfuggente. Nel nostro laboratorio abbiamo quindi utilizzare un approccio diverso. Siamo direttamente studiare gli effetti della delezione del gene KCNE in cardiomiociti isolati da topi knockout per elettrofisiologia cellulare – una tecnica unica che descriviamo in questo numero del Journal of esperimenti visualizzati.

I cuori di geneticatopi ingegnerizzati KCNE lly stanno rapidamente asportato e montato su actininx apparato Langendorff da incannulazione aortica. Atria, parete libera del ventricolo destro e il ventricolo sinistro possono essere separati da tecniche microchirurgiche.

Cardiomiociti atriali e ventricolari di aspetto sano senza contrazioni spontanee vengono immediatamente sottoposti ad analisi elettrofisiologiche dalla tecnica di patch clamp o altre analisi biochimiche nelle prime 6 ore dopo l’isolamento. Preparazione di Cardiomyocytes per elettrofisiologia cellulare, catinina o se gli studi. Please recommend JoVE to your librarian.

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Figura 1 mostra appena cardiomiociti modello isolati atriali e ventricolari. Per cardiomiociti ventricolari si consiglia di utilizzare solo a forma di bastoncello, miociti ventricolari striati di aspetto sano, senza contrazioni spontanee. La striatura caratteristica e l’asta-forma di cardiomiociti ventricolari manca in adulti cardiomiociti atriali murini.

In genere si aspettano di isolare circa 5 – Una volta isolato, cardiomiociti possono essere sottoposte a differenti tecniche in vitro incluse registrazioni elettrofisiologiche Figura 1.

Si consiglia di utilizzare cardiomiociti isolati entro le prime 6 ore dopo l’isolamento. Figura 1 mostra esemplari registrazioni dei canali Kv verso l’esterno a destra di cardiomiociti atriali e ventricolari evocate da fasi differenti da depolarizzazione cellula intera tecnica del patch clamp. Figura 1 In alto a sinistra:.

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Esemplari tracce di clamp intero patch di cellaregistrazione in basso a sinistra Nerbonne alla Washington University di St. Louis nel 3, 5, 7.

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Abbiamo quindi adottato la tecnica di isolamento e Kv protocolli canale di registrazione dal laboratorio Nerbonne e modificato come indicato nella sezione del protocollo di questo articolo per sezionare i canali Kv diversi ripolarizzazione murino, che sono controllati da geni KCNE.

Mediante l’applicazione di inibitori specifici per diversi canali di potassio siamo stati in grado di dimostrare che delezione del gene murino KCNE2 causa una riduzione alva sia Kv1.

Recentemente, due non-sinonimo mutazioni vennero trovate in KCNE1 in pazienti con fibrillazione atriale che non erano presenti nel gruppo di controllo Olesen et al. Meccanicisticamente, studi di espressione eterologa identificato un guadagno-di-funzione effetto KCNQ1 correnti come il probabile meccanismo sottostante.

In uno studio che ha valutato 28 famiglie non imparentate cinesi con fibrillazione atriale isolata, Yang et al. Analisi funzionale del canale mutante in studi di espressione eterologa rivelato un guadagno-di-funzione effetto KCNQ1 canali I Ks Pertanto, l’interruzione di atriali Kv1. Successiva analisi funzionale di questo polimorfismo rivelato che il polimorfismo KCNE4 esercita l’effetto di “guadagno di funzione” sulle KCNQ1 canali 9.

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Incidere la pelle e la parete addominale al di sotto del xifoide avtinina eseguire toracotomia clamshell: Aprire pericardio, individuare grossi wlfa. Premere delicatamente caudale cuore per visualizzare meglio l’aorta. Bloccare l’aorta con pinza. Assicurarsi di conservare una parte sufficientemente grande della aorta ascendente per incannulazione Langendorff. Trasferire cuore staccato immediatamente ad una piastra Petri riempito con ghiaccio freddo e pre-ossigenato soluzione di 1 per le soluzioni, vedi Tabella 1.

Catenina – Wikipedia

Preparazione di perfusione Cuore e Langendorff Incannulare l’aorta con una cannula di acciaio 1. Assicurati di evitare embolia gassosa. Aorta fissarsi sulla cannula con una sutura chirurgica e coronarie filo con 1 ml di soluzione 1.

Collegare cannula con un apparato Langendorff. Rimuovere con attenzione aortica e altri non-tessuto cardiaco con le forbici e scartarla. alaf

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Atri e ventricoli separati e continuare con ciascuna camera separatamente. Mantenere le cellule immersi in soluzione al 4. Utilizzare piccoli volumi meno di 5 ml. Dissociazione ulteriore Cardiomyocytes Cardiomiociti atriali: Per individuare cardiomiociti atriali trasferire gli atri in un apposito pre-riscaldata da mm piastra di coltura e dissociare il tessuto attraverso delicatamente spinge via con una pinza sottile.

Assicurare un dissociazione quasi completa del tessuto. Usare una pipetta da 1 ml con allargata fuoco lucidato punta di plastica pipetta per sospendere le cellule in 1 ml di soluzione di 5 per 5 min.

Separare le cellule dai detriti utilizzando un filtro cella maglia um. Le seguenti operazioni sono gestite sotto una cappa di coltura cellulare.

adtinina Eliminare il supernatante e risospeso il pellet in 5 ml di soluzione 6. Sezionare la regione di interesse ventricolare sinistra con pinza sottile in 5 ml di soluzione 4.

Trasferire la soluzione cellulare dopo il filtraggio maglia micron in un tubo da 50 ml, si aggiunge un volume di 25 ml. Centrifugare per 2 minuti a 16 xg a temperatura ambiente. Rimuovere il surnatante, risospendere il pellet in 25 ml aofa 6 e consentire la sedimentazione delle cellule per 10 min. Contare le cellule e rimuovere il surnatante, aggiungere ml di soluzione 6 sulle cellule. Preparazione di Cardiomyocytes per elettrofisiologia xctinina, biochimica o se gli studi Per gli studi di elettrofisiologia, tenere i miociti in soluzione 6 in una provetta da 50 ml e inibire la sedimentazione.

Rimuovere la soluzione prima di miociti placcatura. Incubare con apfa secondario per 1 ora a temperatura ambiente.

Dopo il lavaggio, trasferire il coperchio di vetro scivola attentamente silano vetrini trattati e cellule embed in fluorescenza mezzo di montaggio. Cellular Elettrofisiologia Eseguire Whole-cell patch-clamp su FREshly isolati cardiomiociti atriali e ventricolari a temperatura ambiente.

Trasferire sani cardiomiociti compaiono nella camera di perfusione riempita con un volume definito della soluzione del bagno extracellulare. Utilizzare NaOH per la regolazione del valore di pH. Utilizzare KOH per la regolazione del valore di pH. Equilibramento dovrebbe essere consentito per minuti prima di “droga” registrazioni. Analizzare i dati non in linea utilizzando pClamp A subscription to J o VE is required to view this article. You will only be able to see the first 20 seconds.

Programmed Actimina Stimulation in Mice. Isolation and Physiological Analysis of Mouse Cardiomyocytes. Get cutting-edge science videos from J actininz VE sent straight to your inbox every month.